До недавнього часу клітинну інженерію вважали галуззю генетичної інженерії, однак, за останнє десятиліття, враховуючи наявність власних методів, конкретних цілей та завдань, вона виділилась як самостійна область біологічних та медичних наук.
У завдання клітинної інженерії входить створення визначеними методами гібридних клітин, які володіють необхідними для дослідника властивостями. Розрізняють наступні гібридні клітини:
Основні методи злиття клітин
- Використання інактивного вірусу Сендай, який відноситься до групи вірусів парагрипу, який інактивований УФ–випромінюванням. Цей метод вже майже не використовується (лише у тих випадках, коли клітини іншими методами не зливаються — при роботі з ядерними еритроцитами птахів).
- Основний метод — використання поліетиленгліколю (ПЕГ). Це стандартний спосіб, який використовується при злитті клітин тварин та рослин, між собою та один з одним. При отриманні гібридом.
- Злиття клітин з використанням лазерного та нейтронного опромінення.
- Електрозлиття — клітини попередньо зближені між собою, піддають впливу електричного поля; спочатку проходить об’єднання мембран, потім об’єднуються цитоплазми і формується гібридна клітина.
Нові методи злиття клітин
- Авдин – біоновий метод. Клітини одного типу (мієлома) з’єднують з авдином, клітини іншого типу (імунні лімфоцити) безпосередньо або через антитіла з’єднують з біотином (вітамін Н). Такі мічені клітини у суспензії з’єднуються попарно і в результаті дії електричного поля, в яке їх поміщають, утворюються гібридомні клітини.
- Метод проточної цитометрії. Цей метод застосовують:
а) для виділення клітин, що знаходяться на певній стадії клітинного циклу та їх синхронізації. Отримані таким шляхом клони життєздатні і дають початок клітинним клонам;
б) для відбору (селекції гібридних клітин). Не всі клітини, що піддаються різним впливам для злиття, зливаються. Для видалення клітин, що не злилися, суміш гібридних і клітин, що не злилися, вирощують на селективному середовищі, де виживають лише гібридні клітини.
Leave a Comment
Щоб відправити коментар вам необхідно авторизуватись.